【摘要】大鼠胰腺经胶原酶消化及纯化后,获得分散较好、纯度较高的胰岛,呈圆形或椭圆形,胰岛结构完整,界限清楚,镜下为不透光实体,双硫腙染色呈深红色(图1),表明为含有β细胞的胰岛细胞团,每只大鼠胰腺平均获得直径在100~300 μm之间的胰岛约为(337.80 ±21.36)个.
【关键词】 胰岛;细胞,培养的;大鼠;胰岛素;时间反应曲线
目的: 探讨外源性胰岛素对离体大鼠胰岛第一时相胰岛素分泌的影响. 方法: 雄性SD大鼠胰腺采用Ⅴ型胶原酶经胰管灌注消化分离得到胰岛,用100 μU/mL外源性胰岛素分别孵育0, 60,120和240 min(n=8)后,给予葡萄糖刺激,分别测定0,3,5,10和30 min胰岛素分泌量. 结果: 不同时间胰岛素预处理后,各组在葡萄糖刺激时均产生胰岛素第一时相分泌(P0.05),但随着胰岛素孵育时间的延长,胰岛素第一时相分泌峰值降低(P0.01). 结论:100 μU/mL外源性胰岛素损害胰岛素第一时相分泌,且孵育时间越长,抑制程度越明显.
正常人的β细胞受到葡萄糖负荷刺激时呈双相式胰岛素分泌. 第一时相胰岛素分泌表现在β细胞受到葡萄糖刺激后l min开始,3~5 min时达峰值,持续约10 min. 第一时相胰岛素分泌虽然短暂,但在调节血糖水平中具有重要的生理意义. 葡萄糖诱导的胰岛素第一时相分泌受损是胰岛β细胞功能障碍的最早标志〔1〕,并预示着2型糖尿病的发生. 目前外源性胰岛素对胰岛β细胞胰岛素分泌的作用尚无定论,有关对胰岛素第一时相分泌的影响的研究报道也较少. 本研究通过观察离体胰岛在外源性胰岛素预处理后对葡萄糖刺激的第一时相分泌的变化,为进一步探讨外源性胰岛素对于胰岛β细胞胰岛素第一时相分泌的影响提供依据.
1材料和方法
1.1材料
雄性SD大鼠35只,体质量 250~300 g,购于第四军医大学试验动物中心. 胶原酶V, Histopaque